COMENTARIO

En el artículo se describe el desarrollo de una técnica de PCR en tiempo real cuantitativa que permite determinar el número de copias del gen ureC. Teniendo en cuenta que existe una única copia de este gen en el genoma de H. pylori permite realizar una cuantificación del número de bacterias que se encuentran en la mucosa.

• En primer lugar optimizan la PCR en Tiempo Real, mediante un LightCycler y realizan una curva estándar que mantienen una relación linear a diferentes concentraciones de ADN (concentraciones en el rango de 6 logaritmos). Con este método se pudieron detectar hasta 1000 bacterias.
• Estudian la reproducibilidad de la técnica repitiendo el ensayo en 15 muestras clínicas seleccionadas al azar y observaron una buena reproducibilidad.
• En otras 85 muestras clínicas realizaron una comparación entre los resultados obtenidos por la PCR cuantitativa y los métodos clásicos de cultivo bacteriano y estudio histopatológico.
• Observan que la mayoría de las muestras positivas por cultivo fueron también positivas por la nueva PCR cuantitativa.
• Sin embargo, muchas muestras que fueron negativas para H. pylori mediante cultivo e histología fueron positivas, con un número elevado de copias, mediante la PCR cuantitativa. Los autores explican este hecho por la presencia de formas no cultivables, como las formas cocoides, que permitirían la detección de ADN y sin embargo que la bacteria no creciera o no fuera detectada por histología.
• No se puede descartar la contaminación de las muestras en alguno de los pasos necesarios para la preparación de la muestra o la realización de la PCR.

En resumen, los autores han desarrollado un método rápido, sensible y mediante PCR en Tiempo Real Cuantitativo que permite detectar H. pylori directamente en la muestra de biopsia gástrica. Sin embargo, quedan dudas sobre el significado clínico de la presencia de resultados positivos sin cultivo ni histología positivos y se necesitará la realización de mas estudios que permitan clarificar estos datos.