Introduccion
COMENTARIO
PCR using 3´-mismatched primers to detect A2142C mutation in 23S rRNA conferring resistance to clarithromycin in Helicobacter pylori clinical isolates. T. Alarcón, D. Domingo, N. Prieto, M. López-Brea.J Clin Microbiol 2000; 38: 923-925.
Se estudiaron 25 aislamientos clínicos de Helicobacter pylori que eran resistentes a claritromicina por dilución en agar para determinar el tipo de mutación en la región peptidil transferasa del gen 23S del ARN ribosomal. Se empleó un método de PCR-RFLP para detectar la mutación A2142G y A2143G. Además se diseño una PCR 3´-mismatched específica de la mutación A2142C.
10 cepas con CMI entre 4 y 8 mg/L presentaban la mutación A2143G y no se observaba amplificación con la PCR 3´-mismatched. 10 cepas con CMI entre 16 y 64mg/L presentaban la mutación A2142G y no se producía amplificación con la PCR 3´-mismatched. Sin embargo en 5 cepas con CMI entre 8 y 64mg/L se produjo amplificación de un fragmento de 700pb con la PCR 3´-mismatched y no se obtuvo digestión con ninguna de las enzimas de restricción utilizada en la PCR-RFLP.
Este método es técnicamente sencillo y permite detectar cepas con la mutación A2142C que no es posible detectarla mediante la PCR-RFLP.
Comentario realizado por Teresa Alarcón Cavero, Servicio de Microbiología, Hospital Universitario de La Princesa.