Introduccion
COMENTARIO
Rapid detection of clarithromycin resistant Helicobacter pylori strains in Spanish patients by polymerase chain reacion-restriction fragment length polymorphism. Agudo S, Pérez-Pérez G, Alarcón T y López-Brea M. Rev Esp Quimioter 2011 (Mar); 24: 32-36.El objetivo de este estudio era determinar la presencia de mutaciones en el gen 23S rRNA que dan lugar a resistencia a claritromicina en cepas clínicas de Helicobacter pylori y evaluar un método de PCR-RFLP para detectar la mutación más frecuente en nuestra población. Helicobacter pylori fue cultivado con los procedimientos microbiólógicos habituales, a partir de biopsias gástricas obtenidas de pacientes sintomáticos. La resistencia a claritromicina fue determinada fenotípicamente mediante E-test. La extracción de DNA fue realizada con la plataforma NucliSens siguiendo las instrucciones del fabricante. Para detectar las mutaciones puntuales en el gen 23S rRNA se analizó la secuencia de los productos amplificados por PCR. La PCR-RFLP fue realizada usando la enzima BsaI para detectar la mutación en la posición 2143 que da lugar a resistencia a claritromicina.
Un total de 42 cepas fueron resistentes a claritromicina. Los resultados de E-test fueron confirmados por PCR en 34 (88.1%) cepas. Hubo 8 cepas de H. pylori resistentes a claritromicina por E-test donde no se encontró ningún punto de mutación en la secuencia del gen 23S rRNA. La mutación A2143G fue encontrada en el 85.3%. La enzima BsaI fue capaz de detectar esta mutación en todas las cepas que la tenían.
En conclusión, la PCR-RFLP es un método fiable para detectar la resistencia a claritromicina en cepas de H. pylori, en especial en países con alta prevalencia como España. Este estudio sugiere que esta prueba puede ser útil antes de elegir el tratamiento erradicador.